Ученые протестировали метод на московских кошках и выяснили, что почти 14% животных заражены бактериями рода Mycoplasma, поражающими красные кровяные клетки.
Микоплазмы встречаются у многих видов млекопитающих, в том числе и у человека. Гемотропные разновидности этих микроорганизмов паразитируют на эритроцитах — клетках крови, которые содержат гемоглобин и транспортируют по кровеносным сосудам кислород.
У кошек чаще всего встречаются три штамма гемотропных микоплазм, вызывающих инфекционную анемию (гемотропный микоплазмоз). Наибольшую опасность представляет Mycoplasma haemofelis. Вызванное им заболевание протекает остро, и если его не лечить, животное, скорее всего, погибнет. При заражении другими штаммами болезнь чаще протекает в скрытой форме, симптомы проявляются лишь при снижении иммунитета.
Раньше гемотропный микоплазмоз выявляли с помощью обычной микроскопии образцов крови. Это доступный метод, но его возможности ограничены. Микроскоп не всегда позволяет определить конкретную разновидность микоплазмы, а на определенной фазе болезни инфекция вовсе не обнаруживается. Для более качественного анализа ученые использовали метод полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Сегодня ПЦР-тест знаком всем. Этот метод выявляет интересующую ДНК, запустив ее многократное копирование (для этого применяют стимулирующий фермент — полимеразу). Особенность новой технологии заключается в том, что можно не только «найти» нужную генетическую последовательность, но и «посчитать» количество копий.
Для этого ученые использовали молекулярные зонды — короткие фрагменты ДНК, способные присоединяться к копируемым участкам. Зонды связаны с флуорецентными красителями, которые при взаимодействии с «мишенью» начинают светиться. Если в образце присутствует искомая ДНК, то при копировании ее концентрация растет, об этом сообщает интенсивность свечения.
«В настоящее время тест-система, использованная в этой работе, вышла на стадию коммерческого производства. Она уникальна не только в России, но и в мире, так как в ходе одной реакции мы можем не только диагностировать инфекционную анемию кошек, но и сразу идентифицировать вид возбудителя», – пояснил руководитель центра клеточных и генных технологий НИЦ "Курчатовский институт – Институт молекулярной генетики" Владимир Демкин.
Ученые НИЦ "Курчатовский институт" обследовали около 750 кошек из Москвы и Подмосковья. Выяснилось, что 13,8% животных заражены гемотропными микоплазмами, причем более половины из них наиболее опасным штаммом.
Исследователи подчеркивают, что возможность определить конкретный штамм бактерии крайне важна для выбора тактики лечения.
Результаты исследования опубликованы в журнале Preventive Veterinary Medicine.